无抗生素发酵饲料对猪体内猪瘟和伪狂犬病毒抗体水平的影响
1 材料与方法
1.1 无抗生素发酵饲料
先将玉米与豆粕按各50%的比例进行称量、粉碎和混合，作为发酵混合物原料;选择由鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌组成的菌种，以料水比为1∶0.45在35℃条件下厌氧发酵60h。发酵前后玉米－豆粕混合饲料营养成分变化见表1。
1.2 试验动物与试验设计
选择出生日期、初生重、健康状况基本一致的仔猪120头(购自河南谊发牧业有限公司)，随机分为2组，每组6个重复，每个重复10头猪。对照组饲喂基础日粮，同时添加50mg/kg土霉素和20mg/kg黄霉素;试验组采用10%的无抗生素发酵饲料替代基础日粮中相应的玉米－豆粕日粮，不添加抗生素。试验基础日粮组成及营养水平见表2。
1.3 饲养管理
试验在河南省鹤壁市谊发牧业进行，采用全封闭猪舍，按照猪场常规免疫程序进行免疫，21日龄断奶，34日龄颈部肌肉注射猪瘟疫苗;在初生时进行伪狂犬疫苗滴鼻接种，50日龄时颈部肌肉注射伪狂犬疫苗。
1.4 样品的采集与处理
分别于仔猪第5，15，28，44，75，179天从每组每个重复中随机抽取1头猪，前腔静脉采集血液5mL，室温倾斜放置1h，4℃过夜，待血清析出后2500r/min离心5min，收集上清液于新的EP管中，－80℃保存。
1.5 测定项目及方法
按照ELISA检测试剂盒(购自北京某公司)说明书进行操作，测定猪瘟、猪伪狂犬病毒抗体水平。猪瘟病毒抗体水平的判定:样品阻断率≥0.4判定为阳性;≤0.3判定阴性;＞0.3～＜0.4判定为可疑，需做重复。猪血清中猪瘟病毒抗体浓度与阻断率成正比。伪狂犬病毒抗体水平的判定:样品S/N值＞0.7判定为阳性;＜0.6判定为阴性;≥0.6～≤0.7判定为可疑，需做重复。猪血清中伪狂犬病毒抗体浓度与S/N值成反比。
1.6数据的统计
分析采用SPASS17.0统计软件对各项数据进行单因素方差分析，显著性水平为P＜0.05，极其显著水平为P＜0.01。
2结果与分析
2.1 无抗生素发酵饲料对猪血清中猪瘟病毒抗体水平的影响
结果见图1：
由图1可知:在5～44d，猪瘟病毒抗体呈现缓慢下降的趋势;44～75d试验组与对照组猪瘟病毒抗体水平都有一定的上升，总体变化趋势一致，经统计学分析，第5，15，25，44天时试验组与对照组之间差异不显著(P＞0.05);第75，179天时试验组显著高于对照组(P＜0.05)。
2.2 无抗生素发酵饲料对猪血清中猪伪狂犬病毒抗体水平的影响
结果见图2：
由图2可知:经统计学分析，5～179d试验组伪狂犬病毒抗体水平与比对照组之间差异不显著(P＞0.05)。
3讨 论
动物机体的动态平衡通过单一菌种调节很难达到，必须通过多种菌种共同发挥其调节作用来实现。复合益生菌由多种菌种按照一定比例配制而成，其中2种或多种组合在一起在一定条件下相互影响、相互作用。研究结果表明，复合益生菌比单一菌株对宿主的益生效果更加明显。在发酵饲料中添加益生菌可以提高发酵饲料中原料的利用率，胡瑞等研究结果表明，在一定条件下添加外源蛋白酶协同微生物发酵可进一步改善发酵豆粕蛋白质品质，显著降低抗营养因子含量，提高发酵豆粕可利用氮的质量。复合益生菌发酵饲料不仅具有发酵饲料的优势，而且由于益生菌的大量繁殖，使得其兼有益生菌的特点。C.H.Huang等研究发现，使用嗜酸乳杆菌、格氏乳杆菌及罗氏乳杆菌复合乳酸杆菌饲喂断奶仔猪与使用单一的乳酸杆菌相比能提高仔猪的生长性能，增强大肠杆菌攻毒的耐受性，改善肠道菌群平衡状态。
初生仔猪从已免疫的母猪初乳中获得抗体，从而获得被动的免疫保护，母源抗体在仔猪体内可维持60d，但随着仔猪日龄的增长，母源抗体呈缓慢下降趋势。在接受免疫前，机体内抗体水平逐渐下降，接受免疫后，抗体水平上升，一段时间之后，抗体水平又逐渐开始下降，与试验结果相符合。如伪狂犬病毒抗体检测，第15天检测抗体水平高于第5天时的水平，是由于仔猪在初生时接受了滴鼻注射疫苗之后体内抗体水平有所下降，即15～25d时的检测结果，直至第35天接受第二次免疫之后，第44天抗体水平上升，第75，179天检测发现，抗体水平又较之前有所下降，随着时间的推移，机体内抗体水平逐渐降低。本试验猪瘟病毒抗体检测中，第75，179天试验组显著高于对照组(P＜0.05)，第5，15，25，44天时试验组与对照组之间差异不显著(P＞0.05);伪狂犬病毒抗体检测中，第25，44，75，179天试验组抗体水平与对照组之间均差异不显著(P＞0.05)。
4结论
长期饲喂复合益生菌发酵饲料可以有效提高猪体内猪瘟和伪狂犬病毒抗体水平，提高机体抗病能力，有望广泛应用于猪场。
